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產品分類技術文章/ Technical Articles
案例一：DAB染色后切片著色一片黃/背景深背景：奧運會期間我們課題組研究生都在實驗室做實驗，許多從北京購買的試劑買不到，對我們的許多實驗產生了很大的影響。我以前一直用中杉金橋的Sp三步法染色試劑盒，效果不錯，在奧運會期間我準備做同批實驗分不同批次酶免疫組化實驗，*批組化實驗結果很好，抗體濃度感覺比較合適(SantaCruz公司1：200)，等做第二批時發現封閉血清不夠了，為了保證實驗順利進行，我又從福州邁新頂了一個SP試劑盒，同時抗體稀釋液也不夠了，我又重新從博士德公司買了一...
實驗原理：細胞中的DNA受1NHC1，60℃水解作用以后，核酸中的嘌呤堿很快*被除掉，使脫氧核糖中潛在的醛基獲得自由狀態。水解后，組織要經水洗再移至希夫（Schiff）試劑中，希夫試劑即同露出來的醛基發生反應，呈現紫紅色。這個反應是Feulgen在1942年提出來的，是DNA的一個特異性檢查法。水解的時間很重要，因為核酸的水解有兩個過程，*，漂呤堿很快被除掉，脫氧核糖中潛在的醛基顯露出來，第二，組蛋白和核酸愈來愈多地被除掉。在短時間的水解作用以后，*個過程占優勢，這時候用希夫...
本文討論的范圍包括RNA酶保護分析，northernblot，原位雜交，半定量RT-PCR和定量RT-PCR。本文不談具體protocol，是因為各種書籍和kit說明書上都有，主要說一些原則，而且大部分是失敗和成功的經驗，還有小組討論結果以及各種書里七零八落看的內容，希望對大家有用。基因表達的定義：說到基因表達，是指RNA，還是蛋白？是指mRNA還是包括風頭正旺的非編碼RNA？mRNA還有不翻譯的RNA呢。應該說轉錄水平指的是RNA水平，而蛋白應該叫翻譯水平？我們這里就特指編...
中文名：異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)英文名稱：Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside用途：異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是一種作用*的誘導劑,不被細菌代謝而十分穩定,因此被實驗室廣泛應用。IPTG常用于需要誘導β-半乳糖苷酶活性的克隆實驗。它常與X-Gal或Bluo-Gal結合使用，用于重組細菌菌落的藍白篩選，這些菌落可以誘導lac操縱子在大腸桿菌中的表達。IPTG與lacI阻遏蛋白結合并改變其構象而發揮作用，防止β-半乳糖苷...
一、原理植物激素（planthormone）免疫定量主要有放射免疫分析（RIA）和酶聯吸附免疫分析（ELISA），由于前者操作上欠安全等原因，目前常采用后一種類型。在ELISA中，抗原抗體反應的檢測依靠酶標記物來實現，常用的酶有辣根過氧化物酶和堿性磷酸酯酶。酶可直接標記激素分子，稱為酶標植物激素，也可標記于第二抗體（識別抗激素抗體Fc片段的抗體或金黃色葡萄球菌A蛋白），稱為酶標二抗。這兩類標記物分別用于固相抗體型和固相抗原型ELISA。A.固相抗體型ELISA：將抗激素的單克...
在細胞中，蛋白質并不是孤單的個體。大多數蛋白通過與分子伴侶或其他蛋白形成復合物而發揮其功能。因此，在了解細胞的生物學特性時，蛋白質相互作用（PPI）研究就成了重要一環。在藥物開發的過程中，這一信息也至關重要，有助于確認藥物靶點。一提起蛋白質相互作用研究，你的腦海中可能馬上浮現出：酵母雙雜交、免疫共沉淀等技術。的確，這些都是經典方法，可有效檢測體內體外蛋白質相互作用。然而，它們不能提供動態的蛋白相互作用信息，似乎還缺乏一些說服力。基于此，共振能量轉移這種方法受到人們的青睞。這種...
痛風發作會在人體關節部位引發炎癥和劇烈疼痛，但過了一段時間后，炎癥通常會自動減弱，疼痛感也逐漸消失。這為何會發生?德國研究人員發現，原因在于一種人體免疫細胞的“自殺式攻擊”。痛風的病因是體內嘌呤物質新陳代謝紊亂，導致尿酸合成增加、排出減少，造成高尿酸血癥。血液中尿酸濃度過高時，尿酸會以微小的鈉鹽結晶(俗稱痛風石)形式析出，積累在關節、軟骨和腎臟中，引發炎癥。德國埃爾朗根大學近日發表研究公報稱，其研究人員發現，人體免疫系統的嗜中性粒細胞在抗擊痛風引發的炎癥中發揮了關鍵作用。實驗...
Dmem(A)細胞培養基（粉末型）成分序號化合物名稱含量(mg/L)序號化合物名稱含量(mg/L)1無水氯化鈣.2H2O265.0018L-絲氨酸42.002硝酸鐵.9H2O0.1019L-蘇氨酸95.003氯化鉀400.0020L-色氨酸16.004無水硫酸鎂97.6721L-酪氨酸72.005氯化鈉6400.0022L-纈氨酸94.006無水磷酸二氫鈉109.0023D-泛酸鈣4.007丁二酸75.0024酒石酸膽堿7.208丁二酸鈉100.0025葉酸4.009L-鹽酸...
Q：westernblot中脫脂奶粉封閉的是哪些蛋白?原理是什么?A：脫脂奶粉中主要是乳清蛋白和酪蛋白。原理就是用非抗原的蛋白去封閉膜，避免標記抗體固定在膜上引起背景增高。Q：請問封閉液和抗體稀釋液用BSA和脫脂奶粉有什么區別呢?有人跟我說奶粉的封閉效果更好些，但是通常只能用于WesterBlot，如果要做elisa或者phagedisplay時候，蛋白鋪板的話，不能使用脫脂奶粉。可是也有人說可以，請問是否有這個說法呢?A：所謂封閉是用以減少或消除載體上的非特異性結合蛋白的分...
考馬斯亮蘭G250與蛋白質結合，在0－1000ug/ml范圍內，于波長595nm處的吸光度與蛋白質含量成正比，可用于蛋白質含量的測定。考馬斯亮蘭G250與蛋白質結合迅速，結合產物在室溫下10分鐘內較為穩定，是一種較好的蛋白質定量測定方法。1.實驗部分1.1儀器與試劑：LabtechUVPOWER紫外分光光度計；玻璃比色皿一套；考馬斯亮藍G250；牛血清蛋白；超純水。1.2試液的制備：牛血清蛋白標準溶液（1000ug/ml）的制備稱取100mg牛血清蛋白置100ml容量瓶中，加...
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